Obtención, purificación y caracterización de inmunoglobulina ''Y'' (IgY) específicas con fines diagnósticos y profilácticos

Abstract

Lawsonia intracellularis (L) es una bacteria intracelular obligada que causa enteropatía proliferativa en los cerdos. Esta bacteria no crece en cultivos convencionales y el desarrollo en cultivos celulares, a baja tensión de oxígeno, resulta excesivamente complejo y caro. Es una enfermedad de difícil diagnóstico donde la tecnología de las IgY podría ser utilizada para el desarrollo de técnicas más eficaces y de menor costo. Hiperinmunizando gallinas ponedoras con cepas de esta bacteria ha sido posible la obtención de IgY específicas. En este trabajo, se evaluó la capacidad de producir IgY específicas contra L empleando una vacuna comercial de cultivo vivo atenuado. Se aplicó un esquema de hiperinmunización a gallinas ponedoras de la Línea Brown Nick. La IgY se aisló de la yema utilizando el método de PEG- precipitación y los extractos obtenidos fueron analizados por electroforesis en geles de poliacrilamida SDS-PAGE. La inmu - nofluorescencia indirecta confirmó la presencia de IgY específicas contra L determinando que la vacuna comercial utilizada como antígeno puede ser utilizada en reemplazo de cepas de la bacteria para la obtención de anticuerpos específicos.

Lawsonia intracellularis is an obligate intracellular bacterium that causes proliferative enteropathy in pigs. The bacterium do not growth in standard mediums, its develop in cellular cultures; under low oxygen tension nevertheless is expensive and complex. It is a difficult diagnosis disease where de IgY technology might be useful in the development of lower cost and more efficacy assays. Throughout the immunization of hens with the strain of the bacterium it is possible to obtain specific IgY. In the present work, it was evaluated the capacity of yield specific IgY against Lawsonia intracellularis by immunizing Brown Nick hens with a commercial live attenuated vaccine. Thereafter, IgY was isolated by precipitation PEG methodology and the ex tract were analysed by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS- PAGE). The indirect immunofluorescence confirmed the presence of IgY specific against Lawsonia intracellularis establishing that the commercial vaccine could be utilised as antigen, instead of the strain of bacterium, as a source of antigen to induce specific immunoglobulins.