Asociación genética entre Loci de histocompatibilidad clase II y número de células somáticas en leche de ganado Holstein de la provincia de La Pampa

Abstract

La mastitis es una enfermedad infecciosa del ganado lechero que conduce a un decrecimiento en la producción y a un incremento en los costos sanitarios. El número de glóbulos blancos por mililitro de leche, conocido como conteo de células somáticas (CCS), se utiliza como indicador de mastitis. Los alelos del Complejo Principal de Histocompatibilidad Bovino (BoLA) han sido asociados con resistencia y susceptibilidad a enfermedades infecciosas. Los cambios en los motivos aminoacídícos presentes en la región de reconocimiento de antígenos, así como las mutaciones en los promotores de los genes del BoLA, influyen sobre la variabilidad de origen genético de la respuesta inmune. El objetivo general consistió en detectar asociaciones entre marcadores genéticos del BoLA y resistencia/susceptibilidad a mastitis, medida a través del CCS, en una población Holstein de La Pampa. Se utilizó un diseño caso/control dividiéndose a la población en estudio (N=128) en 2 grupos de acuerdo al CCS: 1) 250.000 cel/ml y 2) ~ 250.000 cel/ml). Los marcadores BoLA-DRB3 y BoLA-DQA 1 se tipificaron por PCR-RFLP y PCRSBT. El URR-DRB3 se tipificó por PCR-SBT. El test exacto de Fishers y Odds Ratio (OR) de Woolf-Haldane se utilizaron para estudiar la asociación entre el CCS y las variantes alélícas. Los haplotipos se determinaron mediante la utilización del software PHASE y HAPLOVIEW. Los resultados evidenciaron una asociación significativa entre los alelos BoLA-DRB3*23 y *27 (pO,05) con un bajo y alto CCS respectivamente. El gen BoLADQA1*0101 (PCR-SBT) evidenció un OR=4 (p= 0,058). Mediante desequilibrio de ligamiento se detectaron 7 haplotipos del URR-BoLA-DRB3, tres de ellos no estaban reportados. El motivo aminoacldico TY (Treonina y Tirosina) en las posiciones 11 y 30 del bolsillo 6 en los alelo s del BoLA-DRB3, se asoció con un bajo ces (OR=O,11 p=O,03). El análisis de la relación entre aleles del BoLA y resistencia/susceptibilidad a mastitis podría mejorarse con investigaciones profundas en linajes familiares de vacas lecheras.

Mastitis is an infectious disease of dairy cattle which reduces milk yield and increases the costs of production. The somatic cell count (SCC) is the number of white blood cells per milliliter of milk and it is used as a mastitis indicator. The bovine leukocyte antigen (BoLA) alleles have been Iinked to variation in resistance to infectious diseases. The genetic variability of immune response is influenced by changes in amino acid motifs in the antigenbinding groove and by mutations in upstream regulatory region of BoLA genes. The object of this study was to detect significant associations between BoLA genetic markers and SCC as an indicator of resistance/susceptibility to mastitis in a Holstein cattle population of La Pampa. The association between mastitis and BoLA alleles was evaluated using a classical case-control study designo The studied Holstein cattle population (N= 128) was divided into two groups according to SCC: 1) 250,000 cells/ml and 2) ~ 250,OOOcells/ml. The BoLADRB3 and BoLA-DQA 1 alleles were typed by PCR-RFLP and PCR-SBT. URR-ORB3 was typed by PCR-SBT. Fisher's exact test and Woolf-Haldane Odds Ratio (OR) were applied to study the association between SCC and BoLA allelic variants. The haplotypes were determinated using PHASE and HAPLOVIEW software. Significant association was noted between BoLA-ORB3.2*23 and *27 alleles (p 0.05) and protective or susceptibility effects, respectively. Allele BoLA-OQA1*0101 exhibít an OR value=4 (p= 0.058). In order to determine the URR-BoLA-DRB3 haplotypes, linkage disequilibrium analysis was performed and seven haplotypes were detected, three of them corresponded with new haplotypes. Aminoacid motifs of TY (Threonine and Tyrosine) at the 11 and 30 positions of pocket 6 in BoLA-DRB3 alleles were associated with mastitis resistance (OR=O.11 p=O.03). The association analyses between BoLA alleles and resistance/susceptibility to mastitis could be improved with extensive research in family lineages of dairy cows.