Estudio fitoquímico de extractos con actividad antimicrobiana contra Brucella canis obtenidos a partir de plantas nativas y naturalizadas de la provincia de La Pampa, Argentina

Abstract

La brucelosis canina es una enfermedad infecciosa zoonótica causada por Brucella canis. La curación es difícil de lograr ya que tiene tendencia a las recidivas, requiriendo del sacrificio de los animales enfermos en los criaderos para eliminar la enfermedad. Los tratamientos están basados en combinaciones de drogas como tetraciclina, doxiciclina, minociclina y estreptomicina. Considerando la ineficacia de las drogas utilizadas en los tratamientos actuales, el objetivo de este trabajo consistió en investigar la posible presencia de efecto inhibitorio sobre Brucella canis en extractos vegetales obtenidos de plantas recolectadas en la Provincia de La Pampa. Las características de la enfermedad y el escaso éxito logrado con los tratamientos utilizados actualmente, llevó a pensar que las probabilidades de encontrar una o más plantas efectivas eran escasas. Más aún porque no existían estudios previos ni datos etnofarmacológicos que orientaran la búsqueda. Para aumentar las probabilidades de éxito se comenzó evaluando 164 especies recolectadas en la Provincia de La Pampa. Los trabajos en el laboratorio consistieron en seleccionar el método in vitro más adecuado para evaluar el efecto antimicrobiano ya que las variadas propiedades físico químicas y coloración de los extractos impedían la difusión en ágar y dificultaban la lectura de resultados Modificaciones en la técnica de Kirby Bauer permitieron seleccionar cinco especies vegetales. Posteriormente, utilizando Soxhlet y solventes de distinta polaridad se obtuvieron fracciones que fueron evaluadas en medios sólidos para determinar la CIM, seleccionando finalmente por su mayor acción antimicrobiana la fracción metanólica de Prosopis flexuosa var. depressa. Estudios fitoquímicos determinaron la presencia de saponinas, proteínas, lípidos, hidratos de carbono, flavonoides, taninos, sesquiterpenos y alcaloides. Los cuatro últimos mencionados fueron reportados por exhibir propiedades antimicrobianas. Estos resultados permiten pensar que la fracción metanólica de partes aéreas de Prosopis flexuosa var. depressa podría contener compuestos promisorios para emplear en el futuro en el tratamiento de la brucelosis canina.

Canine brucellosis is a zoonotic infectious disease caused by Brucella canis. The cure is difficult to achieve because it has a tendency to relapse, requiring the slaughter of sick animals in hatcheries to eliminate the disease. Treatments are based on drugs combinations, such as tetracycline, doxycycline, minocycline and streptomycin. Considering the ineffectiveness of the drugs used in current treatments, the aim of this work was to investigate the possible presence of Brucella canis inhibitory effect on plants extracts from herbages collected in La Pampa Province. The characteristics of the disease and the low success achieved with updated treatments led to think that the odds of finding one or more effective plants was limited. More so because there were no previous studies or ethnopharmacologic information that would guide the search. To increase the chances of success we began evaluating 164 species collected in La Pampa Province. The laboratory work consisted in selecting the most suitable method in vitro to evaluate the antimicrobial effect as the varied chemical and physical properties and extract coloration impeded the agar diffusion and difficulties the reading results. Changes in the Kirby Bauer technique allowed selecting five plant species. Later on, using Soxhlet and different polarity solvents fractions were obtained that were evaluated on solid media to determine the CIM selecting finally by the higher antimicrobial action methanolic fraction of Prosopis flexuosa var. depressa. Phytochemical studies determined the presence of saponins, proteins, lipids, carbohydrates, flavonoids, tannins, alkaloids and sesquiterpenes. The last four mentioned were reported because they exhibit antimicrobial properties. These results lead us to believe that the methanol fraction of aerial parts of Prosopis flexuosa var. depressa could contain promising compounds for the use in future for the treatment of canine brucellosis.