Caracterización de la envoltura celular de Ochrobactrum anthropi : análisis del rol del sistema TAM

Abstract

La habilidad de los patógenos y simbiontes bacterianos Gram-negativos de tolerar condiciones adversas, modular su permeabilidad a compuestos tóxicos y secretar proteínas/efectores, depende del correcto ensamblado de la envoltura celular, especialmente de la membrana externa (OM). La OM de bacterias Gram-negativas está formada por una bicapa lipídica asimétrica: el lipopolisacárido (LPS) en la cara externa y fosfolípidos en la cara interna. Además, la OM contiene proteínas (OMPs) con estructura de barril β y lipoproteínas, algunas de las cuales interaccionan con otros componentes de la envoltura como el peptidoglicano (PG). Varios aspectos de la translocación y ensamblado de los componentes de la envoltura celular aún son poco comprendidos. En este punto, se estudia el sistema TAM (Translocation and Assembly Module), mediante la proteína TamB, la cual es necesaria para la estabilidad de la OM y la correcta translocación de un subgrupo de OMPs. El objetivo de este trabajo se centra en entender la importancia y el rol de TamB en alphaproteobacterias, utilizando como modelo bacteriano Ochrobactrum anthropi, especie cercana filogenéticamente al género Brucella. Para tal objetivo se evaluarán fenotipos asociados a la envoltura celular y la resistencia a antimicrobianos de dicha especie y la mutante ΔtamB correspondiente. The ability of Gram-negative bacterial pathogens and symbionts to tolerate adverse conditions, modulate their permeability to toxic compounds, and secrete proteins/effectors, depends on the correct assembly of the cell envelope, especially the outer membrane (OM). The OM of Gram-negative bacteria is formed by an asymmetric lipid bilayer: lipopolysaccharide (LPS) on the outside and phospholipids on the inside. In addition, OM contains proteins (OMPs) with a β-barrel structure and lipoproteins, some of which interact with other components of the envelope such as peptidoglycan (PG). Several aspects of the translocation and assembly of cell envelope components are still poorly understood. At this point, the TAM (Translocation and Assembly Module) system is studied, through the TamB protein, which is necessary for the stability of the OM and the correct translocation of a subgroup of OMPs. The objective of this work is focused on understanding the importance and role of TamB in alphaproteobacteria, using Ochrobactrum anthropi as a bacterial model, a species phylogenetically close to the genus Brucella. For this purpose, phenotypes associated with the cell envelope and resistance to antimicrobials of said species and the corresponding ΔtamB mutant will be evaluated.