Determinación de los motivos aminoacídicos presentes en los sitios de unión a los antígenos de los alelos del gen BoLA-DRB3 en una población Holstein de La Pampa y su asociación con mastitis

Abstract

La intensidad de la respuesta inmune eregulada por los motivos aminoacídicos en los sitios de reconocimiento a antígenos (SRA) presentes en los bolsillos de las moléculas presentadoras del Complejo Principal de Histocompatibilidad. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la asociación entre dichos motivos y la resistencia/susceptibilidad a mastitis medida a través del conteo de células somáticas (CCS) en leche de ganado Holstein de la provincia de La Pampa. La población se dividió en: 1) grupo caso con alto CCS y presencia de mastitis (≥ 250.000 cel/ml, susceptible) y 2) grupo control con bajo CCS (< 250.000 cel/ml, resistente). De una muestra de 128 animales, se tipificaron 40 para el segundo exón del gen BoLA-BRB3 mediante la técnica de secuenciación directa; 20 vacas correspondientes a cada grupo. Se detectaron 24 alelos en la población analizada. Se calcularon las frecuencias génicas de los motivos aminoacídicos de los cinco bolsillos (1, 4, 6, 7 y 9) del SRA en los dos grupos de animales. Se utilizó el test Odds Ratio (OR) de Woolf-Haldane para estudiar la asociación. No se hallaron diferencias significativas entre los motivos aminoacídicos de los bolsillos 1, 4, 7 y 9 entre los grupos con alto y bajo CCS. Sin embargo, el motivo T11Y30 del bolsillo 6 (presente en los alelos BoLA-DRB3*0601, *0901 y *4401) evidenció un valor significativo de OR = 0,11 (p= 0,03). Esto sugiere una asociación entre dicho motivo con un menor riesgo a desarrollar mastitis. El rol del motivo aminoacídico T11Y30 en la respuesta inmune de los animales que lo poseen deberá ser validado en poblaciones independientes

The intensity of the immune response is regulated by amino acid motifs in antigen recognition sites (ARS) present in the pockets of Major Histocompatibility Complex molecules. The objective of this work was to study the association between these motifs and resistance/ susceptibility to mastitis measured by somatic cell counts (SCC) in milk from Holstein cattle from the province of La Pampa. The population was divided into: 1) case group with high SCC and presence of mastitis ( ≥ 250,000 cells/ml susceptibility) and 2) control group under SCC ( < 250,000 cells/ml resistant). From a sample of 128 animals, 40 were genotyped for the second exon of BoLA-BRB3 gene by direct sequencing technique, 20 cows for each group. A total of 24 alleles were detected in the analyzed population. Gene frequencies of amino acid motifs of the five pockets (1, 4, 6, 7 and 9) from ARS in the two groups of animals were calculated. Test Odds Ratio (OR) Woolf-Haldane was used to study the association. No significant differences between amino acid motifs of pockets 1, 4, 7 and 9 between groups with high and low SCC were found. However, the T 11 Y 30 motif in pocket 6 (found in BoLA-DRB3 * 0601, * 0901 and * 4401 alleles) showed a significant OR value = 0.11 (p = 0.03). This suggests an association between this motif with a lower risk of developing mastitis. The role of amino acid motif T 11Y 30 in animal immune response should be validated in independent populations